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    常見PCR儀的區別及運用

    發布時間:2021-08-13

    今天我們來了解一下四種常見PCR儀的區別及運用。

    首先是普通PCR儀,它是指:一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀稱作傳統PCR儀,也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運行。主要是用于簡單的、對目的基因退火溫度的擴增。該儀器主要應用于科學研究、教學、醫學臨床、檢驗檢疫等機構。

    其次我們來了解下梯度PCR儀,一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件的PCR儀稱作梯度PCR儀。因為被擴增的不同DNA片段,其最適退火溫度是不同的,通過設置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增,就可以篩選出表達量高的最適退火溫度,進行有效的擴增。用于研究未知DNA退火溫度的擴增,這樣節約成本的同時也節約了時間。梯度PCR儀在不設置梯度的情況下也可以做普通PCR擴增。主要應用科研、教學機構,檢驗、檢疫等。

    然后我們來了解下原位PCR儀。用于從細胞內靶DNA的定位分析的細胞內基因擴增儀稱作原位PCR儀。如病源基因在細胞的位置或目的基因在細胞內的作用位置等。是保持細胞或組織的完整性,使PCR反應體系滲透到組織和細胞中,在細胞的靶DNA所在位置上進行基因擴增。不但可以檢測到靶DNA,又能標出靶序列在細胞內的位置,對于在分子和細胞水平上研究疾病的發病機理和臨床過程及病理的轉變有重大的實用價值。主要應用于臨床、科研。

    最后就是實時熒光定量PCR儀,在普通PCR儀的基礎上增加一個熒光信號采集系統和計算機分析處理系統的PCR儀稱作熒光定量PCR儀。其PCR擴增原理和普通PCR儀擴增原理相同,只是PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結合擴增。擴增的結果通過熒光信號采集系統實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統得出量化的實時結果輸出。把這種PCR儀叫做實時熒光定量PCR儀。

    熒光定量PCR儀有單通道、雙通道和多通道。當只用一種熒光探針標記的時候,選用單通道,有多熒光標記的時候用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標記的目的基因表達產物,因為一次只能檢測一種目的基因的擴增量,需多次擴增才能檢測完不同目的基因片段的量。主要用于醫學臨床檢測、生物醫藥研發、食品行業、科研院校等機構。

     

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    羅氏熒光定量PCR儀

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